2022-1219
細(xì)胞凋亡（apoptosis）是一種在多細(xì)胞生物體中發(fā)生的程序性細(xì)胞死亡形式，屬于細(xì)胞的正常生理過程，在生物體進(jìn)化、內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定以及發(fā)育過程中起著重要作用，具有重要生物學(xué)意義及復(fù)雜的分子生物學(xué)機(jī)制。在生物學(xué)研究過程中常常需要檢測細(xì)胞凋亡情況。目前至少有十?dāng)?shù)種檢測細(xì)胞凋亡的方法，大致可分為基于細(xì)胞形態(tài)、生物學(xué)功能和生化標(biāo)記三大類。每一方法都有其優(yōu)缺點(diǎn)，需要根據(jù)實(shí)際情況選擇適合的細(xì)胞凋亡檢測方法。1、電子顯微鏡檢測方法在透射電鏡下，凋亡細(xì)胞體積變小。凋亡Ⅰ期（pro-apopto...
查看更多2022-1124
充質(zhì)干細(xì)胞是組織的建造者和功能維持者：在組織形態(tài)發(fā)生中負(fù)責(zé)搭建腳手架，分化出骨骼、軟骨、脂肪、纖維等結(jié)締組織，構(gòu)成器官發(fā)育框架結(jié)構(gòu)；而且，間充質(zhì)干細(xì)胞可以分泌數(shù)十種因子，為各種分化細(xì)胞提供所需營養(yǎng)。其基本特性包括：1、強(qiáng)大的增殖能力和多向分化潛能：在適宜的體內(nèi)或體外環(huán)境下分化為成骨細(xì)胞、軟骨細(xì)胞、脂肪細(xì)胞、肌細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞、肝細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、基質(zhì)細(xì)胞等多種細(xì)胞的能力。2、免疫調(diào)節(jié)功能：通過細(xì)胞間的相互作用及產(chǎn)生細(xì)胞因子干擾樹突狀細(xì)胞功能并抑制T細(xì)胞的增殖及其免疫反應(yīng)，從而發(fā)揮...
查看更多2022-1022
耐藥細(xì)胞株一般采用體外低濃度遞增梯度結(jié)合大劑量間歇沖擊的方法，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞對特定藥物產(chǎn)生耐藥性，從而建立相應(yīng)的耐藥細(xì)胞系。細(xì)胞株的服務(wù)內(nèi)容包括哪些？1、在體外，低濃度梯度遞增結(jié)合大劑量間歇沖擊誘導(dǎo)細(xì)胞產(chǎn)生耐藥性。2、藥物對親代細(xì)胞和耐藥細(xì)胞的IC50用2。MTT法，計(jì)算耐藥指數(shù)。目前已知的體外建立耐藥細(xì)胞株的方法有幾種:高劑量藥物沖擊法、提高藥物濃度法、提高藥物濃度與高劑量藥物沖擊相結(jié)合法、轉(zhuǎn)基因藥物篩選法。其中，常用增加藥物濃度法和大劑量藥物沖擊法建立腫瘤細(xì)胞化療耐藥模型。...
查看更多2022-822
細(xì)胞株通過選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的培養(yǎng)物稱為細(xì)胞株，是用單細(xì)胞分離培養(yǎng)或通過篩選的方法，由單細(xì)胞增殖形成的細(xì)胞群。細(xì)胞株的特殊性質(zhì)或標(biāo)志必須在整個(gè)培養(yǎng)期間始終存在。特殊性質(zhì)或標(biāo)志必須在整個(gè)培養(yǎng)期間始終存在。對于人類腫瘤細(xì)胞，在體外培養(yǎng)半年以上，生長穩(wěn)定，并連續(xù)傳代的即可稱為連續(xù)性株或系。細(xì)胞株的建立實(shí)驗(yàn)是通過細(xì)胞與低劑量的藥物長期接觸，引起細(xì)胞本身生物化學(xué)過程的改變，細(xì)胞膜上出現(xiàn)Pgp(或P-170)糖蛋白，使細(xì)胞逐漸對藥物耐受。工具...
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標(biāo)記細(xì)胞株是細(xì)胞系中特定標(biāo)簽（Luc、GFP、RFP等）的穩(wěn)定轉(zhuǎn)移，該細(xì)胞系可用作示蹤細(xì)胞，為細(xì)胞成像和體內(nèi)成像提供了很大的便利。標(biāo)記細(xì)胞株的分離和培養(yǎng)：1、在無菌條件下，取出1-3DSD大鼠的心房組織，然后用PBS清洗組織塊兩次，然后將組織切成1mm3左右；2、在組織塊中加入4ml酶消化液（0.1%胰蛋白酶和0.1%Ⅰ型膠原酶），懸停10s，37℃消化10min，然后用滴定管吹成單細(xì)胞懸液，自然沉淀收集取上清，用10%fbs培養(yǎng)基消化終止后置于4℃；3、剩余組織加入3～4m...
查看更多2022-622
凋亡或者說程序性細(xì)胞死亡，是細(xì)胞內(nèi)建的防御機(jī)制之一，在生物的正常發(fā)育及疾病抵御中起到重要的作用。凋亡過程與通路的異常，會導(dǎo)致多種疾病，包括腫瘤。目前至少有十?dāng)?shù)種檢測細(xì)胞凋亡的方法，從大框架上講，可以劃分為基于細(xì)胞形態(tài)、生物學(xué)功能和生化標(biāo)記三大類。那么細(xì)胞凋亡檢測基于形態(tài)學(xué)的方法是怎么操作的呢？1、電子顯微鏡檢查“凋亡”是一個(gè)細(xì)胞形態(tài)學(xué)概念。因此，鑒定凋亡的金指標(biāo)，往往是基于形態(tài)學(xué)的。凋亡和另外一種主要的細(xì)胞死亡類型“壞死”有著顯著的亞細(xì)胞形態(tài)差異。簡而言之，在透射電鏡下，凋亡...
查看更多2022-520
在制藥行業(yè)，細(xì)胞培養(yǎng)已成為抗體生產(chǎn)的重要組成部分。細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)已被用于生產(chǎn)針對輪狀病毒、脊髓灰質(zhì)炎、天花、肝炎、風(fēng)疹和水痘的抗體?；诩?xì)胞的流感抗體也已獲準(zhǔn)在美國和許多歐洲國家使用。那么細(xì)胞培養(yǎng)的前景如何？3D細(xì)胞培養(yǎng)出于多種原因，對2D細(xì)胞培養(yǎng)的需求正在增加。2D細(xì)胞培養(yǎng)方法包括在平面上將細(xì)胞培養(yǎng)成2D單層。二維貼壁細(xì)胞培養(yǎng)從根本上限制了細(xì)胞的產(chǎn)生。研究人員提出了3D細(xì)胞培養(yǎng)來解決這些問題。這些培養(yǎng)物已被證明在一些基本生物學(xué)機(jī)制的研究中是有效的，例如細(xì)胞數(shù)量監(jiān)測、細(xì)胞活力、...
查看更多2022-419
要了解細(xì)胞凋亡檢測方法，首先要了解細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)變化，形態(tài)學(xué)觀察表明細(xì)胞凋亡的變化是多階段的。細(xì)胞凋亡往往涉及多個(gè)細(xì)胞，甚至少數(shù)細(xì)胞也異步發(fā)生。首先細(xì)胞體積縮小，連接消失，與周圍細(xì)胞分離，然后細(xì)胞質(zhì)密度增加，隨后會發(fā)生一系列變化：線粒體膜電位消失；滲透率變化；將細(xì)胞c釋放到細(xì)胞質(zhì)中；核質(zhì)濃度、核膜和核仁碎裂；DNA被降解成180bp-200bp左右的片段，在細(xì)胞膜內(nèi)形成囊泡；絲氨酸膜表面轉(zhuǎn)向磷脂膜內(nèi)側(cè)；細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)仍然完好無損?？梢詫⒌蛲黾?xì)胞的殘骸分割包裹成若干個(gè)凋亡小體而不...
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